ATP生物荧光检测技术在特定快速微生物检测中的新应用

更新时间:2024-02-20 作者:用户投稿原创标记本站原创 点赞:20362 浏览:86076

Micro-Snap是一项采用改良ATP生物荧光反应的快速检测系统,能够用来检测不同种类样本中的特定细菌.这种新的生物荧光拭子(MicroSnap)通过配套使用一种新的低成本高灵敏光度计(Hygiena公司Ensure多功能监控系统),可检测出各种类型样品中的低水平特定细菌,最长7小时就能得到结果.这项具有诸多优势的实用技术首批推出的是大肠菌群、肠杆菌和大肠杆菌检测拭子.该技术后续将会用于更多其他指示菌和病原菌的快速检测.

一、背景

ATP生物荧光技术在不同行业的成功应用已有30年历史.它作为一种非特异性生物量监控系统已经成功用于各类食品、化妆品和医药品行业,而其中应用最广泛的就是卫生检测.

ATP生物荧光法的最主要应用就是通过对非特异性有机残留物的测定来对清洁和卫生状况做出快速、直接和客观的评价.ATP检测在医疗卫生机构中感染的控制方面的应用新近得到了英国健康保护署(Health Protection Agency)的推荐.它也被执法和稽查审计人员作为一种干预工具来评价卫生状况和查明问题所在区域.

二、技术

Micro-Snap技术将新的试剂配方和ATP生物荧光反应与特异性酶底物偶联在一起,从而在保留高灵敏度的同时,第一次将ATP检测用于特定细菌测定.特定细菌所具有的酶(如β-半乳糖苷酶和β-葡糖醛酸酶)在催化这些底物的过程中发出光子,这些光子能被一种新的高灵敏手持式光度计(Ensure多功能监控系统)检测到.

Micro-Snap检测拭子独特的配方和包装使得其操作简便易用,既可以在实验室使用,也可以在偏远地区或现场使用.

Micro-Snap拭子反应过程:

ATP+特异性底物+荧光素酶—特异性诊断酶→光

三、性能

与传统方法相比,Micro-Snap生物荧光检测技术具有高特异性和灵敏度(见表1).样本中细菌数量越高检测时间越短,低数量的细菌(1~5个菌)检测时间也只需7小时左右(见表2).

表1 Micro-Snap的灵敏度和特异性

表2 Micro-Snap的检测限

Micro-Snap检测拭子的技术原理使其能够不会受到来自样品ATP的本底干扰.同时早期和高灵敏的检测也消除了传统微生物培养中因其他竞争性微生物生长所导致的干扰问题.

图1 绿叶沙拉中大肠杆菌的检测

图1显示,在>10,000个自然菌丛存在的条件下,将5个大肠杆菌接种至沙拉悬液中,不到7个小时即可检出.高接种量的样本检测时间更短.


四、应用

Micro-Snap肠杆菌、大肠菌群和大肠杆菌快速检测拭子可以用于以下方面:

(1)评价清洁度的表面卫生检测,包括工业加工过程和医疗卫生机构有无受到粪便污染;

(2)质量和安全检测,包括工业加工中的原材料或成品、工艺水、饮用水等;

(3)快速确认平板上生长的相关菌落(检测时间2分钟).

五、总结

Micro-Snap生物荧光拭子能在7小时左右检测出低水平(1~5CFU)的特定细菌污染,而大多数传统微生物检测方法或替代方法则需要至少18~24小时方能给出结果.Micro-Snap系统操作简单易用,配套Ensure多功能监控系统可以在同一个工作日内给出检测结果,从而使用户能及时得到有价值的信息.